黃曲霉毒素M_1檢測試劑盒

黃曲霉毒素具有很強的毒性和潛在致癌性,是真菌Aspergillus flavus和Aspergillus parasiticus變種的高毒代謝物。Aflatoxin M1是Aflatoxin B1的轉(zhuǎn)化物,由食用含有Aflatoxin B1飼料的動物分泌至奶汁中。為了對黃曲霉毒素進行有效監(jiān)控,必須有靈敏、特異、快速、可靠、容易普及的方法進行檢測作為保障。為了對制備的單克隆抗體進行檢測,本文根據(jù)江永華等的報道,對其方法進行改進,用EDC法制備出黃曲霉毒素M1與卵清白蛋白的結(jié)合全抗原。本課題利用潘崴所得到的雜交瘤細(xì)胞株,制備腹水,采用正辛酸硫酸銨法和硫酸銨法對其進行了純化,得到了大量黃曲霉毒素M1單克隆抗體;制備了酶標(biāo)黃曲霉毒素M1抗體;建立了競爭法ELISA測定黃曲霉毒素M1的方法,并在此基礎(chǔ)上制備了黃曲霉毒素M1酶免疫檢測試劑盒。很多發(fā)達(dá)國家對乳中的黃曲霉毒素進行了測定,我國對乳制品中的黃曲霉毒素也進行過局部小范圍內(nèi)的調(diào)查,本課題在上海(光明)、石家莊(三鹿)、天津(海河)等國家主要乳制品產(chǎn)地進行大范圍的采樣,利用本實驗室制備的試劑盒對168個原料乳奶樣中的黃曲霉毒素M1進行了檢測,均符合國家標(biāo)準(zhǔn)0.5 ppb,其中有兩個原料奶的黃曲霉毒素M1含量介于0.25-0.5ppb之間,約占1.2%,其余均小于0.25ppb。根據(jù)所測結(jié)果制定出合理的黃曲霉毒素預(yù)警值0.25ppb,符合我國現(xiàn)狀,有利于逐步與接軌。

• *章 前言8-26
• 1.1 食品中的真菌毒素8-10
• 1.2 黃曲霉毒素的研究概況10-17
• 1.3 分析方法17-18
• 1.4 黃曲霉毒素在食品中的污染及*18-25
• 1.5 課題研究依據(jù)25-26
• 第二章 單克隆抗體技術(shù)的簡介及ELISA 方法的技術(shù)要點26-41
• 2.1 單克隆抗體技術(shù)的簡介26-28
• 2.2 ELISA 方法的技術(shù)要點28-35
• 2.3 ELISA 的類型35-41
• 第三章 實驗方法與材料41-52
• 3.1 細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇41
• 3.2 單克隆抗體的大量制備41-42
• 3.3 黃曲霉毒素M1-OVA 全抗原的制備42-44
• 3.4 電泳44-47
• 3.5 抗體的純化47-49
• 3.6 酶-抗體結(jié)合物的制備49-50
• 3.7 試劑盒檢測黃曲霉毒素 M150-52
• 第四章 結(jié)果52-61
• 4.1 黃曲霉毒素M1全抗原的制備52-54
• 4.2 所得腹水和純化后黃曲霉M1抗體的電泳圖54
• 4.3 ELISA 方法檢測原料奶中黃曲霉毒素的數(shù)據(jù)54-61
• 第五章 分析與討論61-77
• 5.1 數(shù)據(jù)處理分析61-72
• 5.2 討論72-77
• 第六章 結(jié)論77-79
• 參考文獻79-83
• 論文、參加科研情況說明及學(xué)位論文使用授權(quán)說明83-84